www.biotechugamg.fora.pl

Robert

hej,

pamięta ktoś kolejność próbek z blota? (nie 'błota' Razz

)

gr. a/1 :>

Gosia

tak, martynka, powiem jej żeby napisała.

Martyna

Kolejność w Westernie: 1) DH5alfa 2) DH5alfa + plazmid, przed indukcją 3) marker NB 4-8 ) grupa Agnieszki [kolejność nanoszenia FRNr, FR, NZ, E1, E2], 9-13) grupa Roberta, 14-18 ) Asia i Cień
Kolejność w żelu do barwienia CB: 1) DH5alfa 2) DH5alfa + plazmid, przed indukcją 3) marker NB 4-8 ) Cień, 9) wolna studzienka 10-14) Ola, Gosia i ja, 15-19) Aga

Robert

dzięki!

Robert

eee, nie kumam :< albo źle studzienki numeruję, albo ten blot się nie zgadza z tym, co podałaś, Martyna. Pisałaś o markerze nb (nie barwionym czyli), ale użyliśmy przecież barwionego, który w dodatku jest w 2giej (17tej - zależy z której strony liczyć) studzience, a nie 3ciej Razz

albo mi się coś ostro pochrzaniło Razz

Gosia

na pewno jest w trzeciej, w pierwszej są kk nietransformowane od nich, a w drugiej nietransformowane nasze, które nanosiła asia n.
Chyba że mnie pamięć zawodzi..

Robert

jak patrzysz na skan błony, to Ci się zgadza? bo to co napisałem opieram na wyglądzie skanu Smile

Gosia

no nie, masz rację Smile

coś dziwnego tam jest ;p

Martyna

Mam napisane tak, jak było mówione, ale to rzeczywiście wygląda dziwnie: jakby był nałożony i marker, i bakterie. Ten kto nakładał, na pewno wie, co tam jest.

Ailin

chodzi o to że dwie pierwsze studzienki się w sumie zlały już na żelu a do studzenki z markerem się odrobinę przelało

czy dziewczyny co robiły płukania mogły by napisać co było zmienione??

i Robert i Grzesiek napisać jak robili bufor do pół-mokrego transferu??

Aś

więc dwie zmiany właściwie były:
- wszystkie płukania tylko w TBS, nigdy z mlekiem
- substrat do alkalicznej fosfatazy robiony w buforze do alkalicznej fosfatazy, a nie w TBS (na 30ml buforu AF)

n3l

nie wiem jak was ale mnie to wszystko wkurza bo zamiast sie skupic na uczeniu na kolo to sie stresuje sprawkiem, a tu jest totalny burdel bo kazda osoba robila inny bufor i nikt nikomu nie podaje zadnych danych(to dotyczy takze i mnie - bo ja tez cos robilam i ich nie umiescilam) nie ma szans tego samemu wydedukowac bez znajomosci stockow. a czemu to wszystko pisze, bo chce was sie zapytac co sadzicie o tym zeby im powiedziec ze nie dalismy rady przygotowac dobrych sprawozdan i jeszcze sie nauczyc na kolo i zeby oddac je im dopiero w srode-czwartek. napisac maila moge z pytaniem do dawida o to jak chcecie?

Robert

ja jestem za - w sumie sam nie pamiętam co zmienialiśmy w buforze do transferu, nawet nie jestem pewien czy robiłem go ja czy Grzesiek; w sprawku napisałem tylko, że używaliśmy "buforu do transferu" i tyle

@Aś: dzięki!

Aś

i tak co się wywiedziałam - pytania były przewidywalne, zadanie obliczeniowe nieskomplikowane, wszystko dotyczyło głównie konkretnie tego co się na labach działo, czyli nie warto czytać gratisów tylko protokoły i to co w sprawkach ewentualnie =)
tylko nie wiem czy to dotyczy wszystkich grup ;/

grzesiek

moze byc, w sumie robilismy przeciez transfer mokry a nie pol-suchy i bufor to bylo TBS (albo PBS) po prostu 1x stezone (stockiem bylo 2x stezone chyba). Robert - to bylo to co zrobilsmy 900ml zamiast litra bo stocku bylo za malo.